【岐黄之术】

(一)免疫金法

《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

1987年,Geoghegan等首次应用免疫金探针检测B淋巴细胞表面抗原,建立了用于光镜水平的免疫金法(Immunogold staining, IGS)。IGS的特点是染色程序简便,不要显色,就能检测细胞表面的抗原,又能检测细胞内抗原。染色时免疫金法一般要求金颗粒的直径大于20nm,并且用的浓度较高。用IGS定位细胞抗原时一般都采用间接法,下面以人肝组织HBsAg的定位为例说明IGS的步骤:

(1)石蜡切片→脱蜡至水。

(2)0.1%胰蛋白酶消化10min或3mon/L尿素消化30min。

(3)用双蒸水振洗5'×2。

(4)用0.02mol/l TBS pH8.2振洗10'×2。

(5)1%卵蛋白(EA)封闭10min。

(6)稀释鼠抗HBsAg单克隆抗体(用0.02mol/l TBS pH8.2 作1:100稀释),4过夜。

(7)0.02mol/l TBS pH8.2振洗10'×2。

(8)1%EA封闭10min。

(9)0.02mol/l TBS pH8.2 稀释兔抗鼠金标抗体(1:8)37℃45min。

(10)0.02mol/l TBS pH8.2振洗10'×2。

(11)双蒸水振洗5'×2。

(12)1%戊二醛,10min。

(13)双蒸水5min 。

(14)用苏木素衬染核1min,甘油封片。

结果:在光镜下可见部分肝细胞浆内有金颗粒聚集呈红色,沿细胞膜分布,表明有HBsAg定位在细胞浆内。

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  1. 免疫金法《实用免疫细胞与核酸》
  2. 免疫金的特性和制备《免疫学和免疫学检验》
  3. 免疫金及免疫金银技术的优点《实用免疫细胞与核酸》
  4. 免疫胶体铁细胞化学染色《实用免疫细胞与核酸》
  5. 免疫金技术发展史《实用免疫细胞与核酸》
  6. 免疫胶体铁细胞化学《实用免疫细胞与核酸》
  7. 免疫金探针的鉴定《实用免疫细胞与核酸》
  8. 免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择《实用免疫细胞与核酸》
  9. 免疫金银法《实用免疫细胞与核酸》
  10. 免疫记忆《医学免疫学》
  11. 免疫金银染色《免疫学和免疫学检验》
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  16. 免疫和免疫反应《默克家庭诊疗手册》
  17. 免疫耐受的临床意义《医学免疫学》
  18. 免疫固定电泳《免疫学和免疫学检验》
  19. 免疫耐受的终止《医学免疫学》
  20. 免疫功能障碍《病理生理学》
  21. 免疫耐受现象的发现《医学免疫学》
  22. 免疫功能的变化《病理生理学》
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  27. 免疫球蛋白Fc段受体《细胞和分子免疫学》
  28. 免疫复合物的检测《免疫学和免疫学检验》
  29. 免疫球蛋白超家族《细胞和分子免疫学》
  30. 免疫辅佐细胞《免疫学和免疫学检验》
  31. 免疫球蛋白超家族《细胞和分子免疫学》

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