一、特异性目的核酸(或基因)的制备
核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备:
(1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。
(2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚,分子量较小的寡核苷核。
(3)酶促合成核酸:在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板,利用逆转录酶合成单链cDNA,再以大肠杆菌DNA聚合酶I合成双链的结构基因。
(4)RNA探针。
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