2．

在电镜技术的应用原则是二步标记法，可用于包埋前和包埋后染色。其主要区别于一般胶体金免疫染色在：①须1%卵白蛋白—PBs （pH7.4）或1%卵白蛋白—0.05mol/l Tris缓冲液（pH7.4）来封闭非特异性的结合部位，而不是采用羊或其它的动物的正常抗血清，因为PAg复合物能够与正常血清组中的Ig结合，从而给出假阳性结果；②在应用第一抗血清孵育和PBS冲洗后作第二抗血清即PAg复合物孵育前的准备时，应用的PBS或TBS的pH应变更为pH7.4。在变更这两步后，其它可参照本节　中包埋前、后染色法进行。也可采用下列步骤进行包埋后染色。

（1）载有超薄片的镍网或金网浮于1%卵白蛋白—PBS液滴上，室温约5min。

（2）载网不冲洗，直接移至第一抗血清液滴上，在室温孵育2h或4℃18～24h。

（3）PBS冲洗3min×2次。

（4）将PAg原液稀释10～20倍，载网浮于该液滴上，室温孵育1h。

（5）PBS冲洗5min×2次。

（6）5%醋酸铀水溶液染色，水洗。

（7）枸椽柄铅染色。

（8）电镜观察。