四、蛋白质的胶体金标记

《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下:

(1)根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。

(2)在电磁搅拌下,将蛋白质溶液加入胶体金溶液中(pH已调至PI超过0.5pH),加入蛋白质时应逐滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。

(3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEg MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记胶体金,放在4达2年半仍然保持良好性能,而用PEG稳定的标记胶体金放在4℃1年左右就有分层现象,而且染色效果显著下降。因此,我们认为最好还是用BSA作稳定剂。

(4)将标记好的胶体金装入透析袋中,两头扎紧,放入蔗糖或硅胶中浓缩,浓缩到原体积的1/10量,浓缩完毕后纯化。离心法纯化时,不要浓缩。

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  1. 蛋白质的胶体金标记《实用免疫细胞与核酸》
  2. 蛋白质的基本组成单位——氨基酸《生物化学与分子生物学》
  3. 蛋白质的胶体性质《生物化学与分子生物学》
  4. 蛋白质的分类《生物化学与分子生物学》
  5. 蛋白质的结构及其功能《生物化学与分子生物学》
  6. 蛋白质的二级结构《生物化学与分子生物学》
  7. 蛋白质的结构与功能的关系《生物化学与分子生物学》
  8. 蛋白质的呈色反应《生物化学与分子生物学》
  9. 蛋白质的空间结构《生物化学与分子生物学》
  10. 蛋白质的沉淀《生物化学与分子生物学》
  11. 蛋白质的理化性质《生物化学与分子生物学》
  12. 蛋白质的变性《生物化学与分子生物学》
  13. 蛋白质的两性电离和等电点《生物化学与分子生物学》
  14. 蛋白质代谢特点《临床生物化学》
  15. 蛋白质的三级结构《生物化学与分子生物学》
  16. 蛋白质代谢变化《病理生理学》
  17. 蛋白质的生化《临床营养学》
  18. 蛋白质代谢《病理学》
  19. 蛋白质的生理功用《临床营养学》
  20. 蛋白质代谢《病理生理学》
  21. 蛋白质的生物合成《生物化学与分子生物学》
  22. 蛋白质《预防医学》
  23. 蛋白质的四级结构《生物化学与分子生物学》
  24. 蛋白质《食物疗法》
  25. 蛋白质的吸收《生理学》
  26. 蛋白尿指数(S@@PI)《常用化验值及意义》
  27. 蛋白质的一级结构《生物化学与分子生物学》
  28. 蛋白尿形成的原因和机制《临床基础检验学》
  29. 蛋白质的元素组成《生物化学与分子生物学》
  30. 蛋白尿《临床生物化学》
  31. 蛋白质翻译后加工修饰《生物化学与分子生物学》