五、抗着丝点抗体的检测方法

1．HEP-2细胞涂片的制备HEP-2细胞系人喉癌上皮细胞，在完全Eagle培养液中，37^℃，二氧化碳孵育48～72h，使细胞生长达到一定数量，约1.2～1.5×10⁶/ml，经胰酶消化后，可以传代或分装到置有玻片的培养皿中，继续用Eagle液培养及上述条件孵育，48h细胞不仅贴附于玻片上并已长成单细胞层。取出玻片用丙酮固定15min，自然干燥后待用，或保存于-20^℃或4℃中。

表15-3 各种抗核抗体及临床意义

注：Sm（Smith）；RNP：核糖核蛋白；Sn：为小核；SSB：干燥综合征B；SS-A：干燥综合征-A，Scl-70：硬皮病70，抗原分子量70000；PCNA：增殖细胞抗原；PM-1：多发性肌炎-；RANA：类风湿性关节　核抗原；dsDNA：双链DNA；ssDNA：单链DNA。

2．染色方法用间接免疫荧光法。

3．结果着丝点抗原是紧附于染色体着丝点的DNA蛋白质，当与相应抗体结合后荧光图型为约46个圆的荧光亮点。国际上多用HEP-2细胞，因这种细胞核大，分裂相旺盛，着丝点容易显露，这种抗体在进行性系统性硬化症（PSS）中阳性率可达31%～98%，是PSS的CREST型的标记抗体，CRESF是指具有软组织钙化，雷诺现象，食管功能低下，指端硬化，毛细血管扩张的PSS患者。