【岐黄之术】 > 中医杂集 > 《实用免疫细胞与核酸》

四、 ICC在原位杂交技术中的应用

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《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

传统的ICC法主要用于检测组织细胞中含有何种物质，根据该物质的作用，推测其组织细胞生理、病理意义。但该物质来自何处，是否是阳性细胞合成往往较难判断，结合免疫电镜及双重染色等方法，在某种程度上，有助于推断该物质的来源。然而通常ICC法显示的是组织细胞已经合成的物质（过去时），本身不能说明阳性组织细胞目前的功能状态，亦无法预测细胞将合成何种物质，发挥什么功能，因此，单纯的ICC法存在着被动性。

近年来，ICC法与原位杂交技术结合，使细胞内活性DNA可视化，直接显示某染色体上，何种基因活性化或非活性化，描述组织细胞现在的状态，同时亦可预知未来组织细胞将合成何种物质，发挥哪些功能等，直接观察组织细胞的时空改变，这在病理生理研究中有着重要意义，为形态学研究开辟了令人瞩目的前景。

众所周知，机体内不同的蛋白质发挥其特定的功能，与其氨基酸序列密切相关，而它的氨基酸序列又是DNA通过mRNA转录控制的。因此检测该DAN/mRNA的分布，可判断组织细胞的功能状态。为在组织细胞水平检测DNA/mRNA等一定碱基序列的核酸存在与否，Gall（1969）等建立了原位杂交方法（详见第二十章　）。

在检测某种特定的蛋白质在哪一类细胞内合成时，常常应用连续切片或镜影切片，原位杂交法显示合成该蛋白质的mRNA，ICC法染色其蛋白质抗原，二者存在于同一细胞时，具有较强的说服力。同一切片进行上述双重染色时，原位杂交步骤中，大多数抗原物质的抗原性往往易被破坏，所以最好在ICC染色后再进行原位杂交染色。ICC染色中，抗体内含有RNase等可能破坏细胞内的mRNA，为此应选用精制IgG抗体，并加入500u/ml肝素抑制RNase。肝素系酸性多糖，其化学性质与核酸类似，能够与以核酸为底物的酶（RNase）结合，从而保护mRNA免受破坏。另外，ICC染色以DAB呈色时，核酸探针易吸附于DAB产物上，需注意。

近年随着细胞工程的进步，ICC、原位杂交技术将在细胞生物学、组织学、遗传学、病毒学、临床疾病诊断等各个领域，得到更广泛地应用。

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  1. ICC在原位杂交技术中的应用《实用免疫细胞与核酸》
  2. ICC在细胞功能研究中的应用《实用免疫细胞与核酸》
  3. IEF电泳检测ApoE表型《动脉粥样硬化》
  4. ICC在铺片中应用《实用免疫细胞与核酸》
  5. IFN《细胞和分子免疫学》
  6. ICC的双重染色法《实用免疫细胞与核酸》
  7. IFN-α和IFN-β《细胞和分子免疫学》
  8. ICC的几种特殊应用《实用免疫细胞与核酸》
  9. IFN-γ《细胞和分子免疫学》
  10. I《传染病》
  11. IFN的临床应用《细胞和分子免疫学》
  12. I《医学遗传学基础》
  13. Ig Fe受体《医学免疫学》
  14. I《医学统计学》
  15. IgA《医学免疫学》
  16. H因子受体《细胞和分子免疫学》
  17. IgA肾病《赵绍琴临证验案精选》
  18. H因子《细胞和分子免疫学》
  19. IgA肾病《病理学》
  20. HyperApoB的病理生理《动脉粥样硬化》
  21. IgD《医学免疫学》
  22. HT症门（附?）《丹台玉案》
  23. IgE《医学免疫学》
  24. HT症《喉舌备要秘旨》
  25. IgE合成的调节及其受体《医学免疫学》
  26. HT舌喉痈《重订囊秘喉书》
  27. IgE介导的炎症《免疫学和免疫学检验》
  28. HT痧秘方《华佗神方》
  29. IgG《医学免疫学》
  30. HT沙《痘疹心法要诀》
  31. IgM《医学免疫学》

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