六、物理显影液及缓冲液的配制
(一)缓冲液的配制
(1)0.05mol/l pH7.4 TBS 配制
Tris(三羟甲基胺基甲烷)12.1g
NaCl 17.5g
加双蒸水1900ml
然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml
Tris 4.84g
NaCl 17.5g
BSA 2.0g
NaN31.0g
双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8.2,再加双蒸水至2000ml。
(二)银显影液的配制
1.乳酸银显影液的配制:混合以下溶液
①10%阿拉伯胶水溶液60ml
②枸橼酸缓冲液pH 3.5 10ml
③对苯二酚1g,加双蒸水20ml溶解。
④乳酸银水溶液100 mg加水10ml。
注意在暗处显影。
2.硝酸银显影液的配制
①10%阿拉伯胶水溶液60ml。枸橼酸缓冲液ph 3.5 10ml
②对苯二酸1.7g水溶液30ml。
③硝酸银40mg水溶液2ml。
①②两溶液完全溶解,临用前加入硝酸银溶液。在暗处显影。
4.彩色显影液的配制
①0.2N氢氧化钠的异丙醇溶液5ml溶入100mgα-萘酚(或菲尼酮)。
②500mg碳酸钠,25mg溴化钾,50mg亚硫酸钠,加双蒸水25ml。
①②两液1:10混合,室温下彩色显影。
5.醋酸银显影液
①15%阿拉伯胶60ml,柠檬酸缓冲液10ml,pH3.5。
②对苯二酚1.7g溶于20ml蒸馏水中。
③醋酸银100mg溶于蒸馏水10ml中。
用前①②③依次混合,不需要避光,在室温下显影。
(三)柠檬酸缓冲液的配制
柠檬酸(C6H8O7.H2O)25.5g
柠檬酸三钠(Na3C6H5O7.2H2O)23.5g
加重蒸水100ml溶解即成,pH3.5
(四)氢氧化钠(NaOH)无水乙醇饱和溶液的配制
8g氢氧化钠,加入100ml无水乙醇振摇溶解即成。
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