六、物理显影液及缓冲液的配制

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(一)缓冲液的配制

(1)0.05mol/l pH7.4 TBS 配制

Tris(三羟甲基胺基甲烷)12.1g

NaCl 17.5g

加双蒸水1900ml

然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml

Tris  4.84g

NaCl  17.5g

BSA 2.0g

NaN31.0g

双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8.2,再加双蒸水至2000ml。

(二)银显影液的配制

1.乳酸银显影液的配制:混合以下溶液

①10%阿拉伯胶水溶液60ml

枸橼酸缓冲液pH 3.5 10ml

③对苯二酚1g,加双蒸水20ml溶解。

④乳酸银水溶液100 mg加水10ml。

注意在暗处显影。

2.硝酸银显影液的配制

①10%阿拉伯胶水溶液60ml。枸橼酸缓冲液ph 3.5 10ml

②对苯二酸1.7g水溶液30ml。

③硝酸银40mg水溶液2ml。

①②两溶液完全溶解,临用前加入硝酸银溶液。在暗处显影。

4.彩色显影液的配制

①0.2N氢氧化钠的异丙醇溶液5ml溶入100mgα-萘酚(或菲尼酮)。

②500mg碳酸钠,25mg溴化钾,50mg亚硫酸钠,加双蒸水25ml。

①②两液1:10混合,室温下彩色显影。

5.醋酸银显影液

①15%阿拉伯胶60ml,柠檬酸缓冲液10ml,pH3.5。

②对苯二酚1.7g溶于20ml蒸馏水中。

③醋酸银100mg溶于蒸馏水10ml中。

用前①②③依次混合,不需要避光,在室温下显影。

(三)柠檬酸缓冲液的配制

柠檬酸(C6H8O7.H2O)25.5g

柠檬酸三钠(Na3C6H5O7.2H2O)23.5g

加重蒸水100ml溶解即成,pH3.5

(四)氢氧化钠(NaOH)无水乙醇饱和溶液的配制

8g氢氧化钠,加入100ml无水乙醇振摇溶解即成。

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