四、影响PCR特异性的因素

《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

通过上述内容。可以看出有许多因素可以影响PCR的特异性,在此我们作一归纳,供大家参考:①退火步骤的严格性:提高退火温度可以减少不匹配的杂交,从而提高特异性。②减短退火时间及延伸时间可以减少错误引发及错误延伸。③引物二聚体是最常见的副产品,降低引物及酶的浓度也可以减少错误引发,尤其是引物的二聚化。④改变MgCl2(有时KCl)浓度可以改进特异性,这可能是提高反应严格性或者对Taq酶的直接作用。⑤模板中如果存在次级结构,例如待扩增的片段易自行形成发夹结构时,可在PCR混合物中的4×dNTPs中加入7-脱氮-2’-脱氧鸟苷-5’-三磷酸(7-deaza-2’-deoxyguanosine-5’-trihosphate)(de7GTP)。用de7GTP与dGTP比例为3:1的混合物(150μmol/l de7GTP +50μmol/L dGTP)代替200μmol/l dGTP,则可阻非特异性产物的生成。

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  1. 影响PCR特异性的因素《实用免疫细胞与核酸》
  2. 影响DNA提取质量的因素《实用免疫细胞与核酸》
  3. 影响胞浆膜的通透性《药理学》
  4. 蝇子入肠《孙真人海上方》
  5. 影响病人伤口感染发生的因素《临床激光治疗学》
  6. 蝇影飞越《中医词典》
  7. 影响大脑功能康复的因素《医学心理学》
  8. 蝇蚊小虫入耳《奇效简便良方》
  9. 影响电极电位的因素《医用化学》
  10. 蝇头蟹眼《中医词典》
  11. 影响电泳迁移率的因素《临床生物化学》
  12. 蝇候《诸病源候论》
  13. 影响动物实验效果的动物因素《实验动物科学》
  14. 蝇翅黑花《银海精微》
  15. 影响肺部气体交换的因素《生理学》
  16. 蝇翅黑花《中医词典》
  17. 影响辐射生物学效应的因素《核、化学武器损伤》
  18. 《人体寄生虫学》
  19. 影响骨生长的因素《组织学与胚胎学》
  20. 营治城廓《养生导引秘籍》
  21. 影响骨折愈合的因素《病理学》
  22. 营治城郭《中医词典》
  23. 影响骨折愈合因素《骨科学》
  24. 营养治疗在医疗上的重要性《临床营养学》
  25. 影响光谱分析的主要因素《临床生物化学》
  26. 营养治疗的重要性《基础护理学》
  27. 影响硅肺发生的因素《预防医学》
  28. 营养治疗的基本原则《基础护理学》
  29. 影响核酸生物合成的药物《药理学》
  30. 营养治疗的基本原则《临床营养学》
  31. 影响化学反应速度的其它因素《医院药学》