【岐黄之术】 > 中医杂集 > 《实用免疫细胞与核酸》

四、免疫电镜金—银法染色技术

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《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

关于免疫金银细胞化学的原理、试剂配制和光镜显示技术在本书第五章　已作了较详尽的叙述。免疫金银细胞化学技术说可应用于电镜水平。一般用于包埋前染色。其主要操作步骤如下：

（1）组织固定振动切片机切片10～30μm。

（2）人3%正常羊血清，含0.1%Triton X—100 的PBS孵育30min，以封闭非特异性结合部位

（3）1%硼氢化钠的PBS孵育30min。

（4）一抗37℃，2h。

（5）PBS含0.1%BSA pH7.4 冲洗3min×3次。

（6）PBS含0.1%BSA pH8.2 冲洗3min×3次。

（7）人10～15nm金标羊抗兔抗血清，工作浓度约1：10，37℃孵育45min。

（8）硝酸银液物理显影（详见第五章　第六节　）。

（9）在解剖显微镜下取免疫反应阳性部位，人1%锇酸后固定20min，常规脱水，树脂包埋。

（10）超薄切片机切0.1μm左右半薄切片,定位阳性反应部位,制超薄切片。如有暗视野微镜则更有助于定位。在暗视野前景下，金银粒呈金黄色闪光颗粒，即使微量金银也可定位，微镜则更有助于定位。在暗视野前景下，金银粒呈金黄色闪光颗粒，即使微量金银也可定位。

（11）铀—铅电镜染色，电镜观察。

免疫金银法敏感度高，金银颗粒电子密度高，反差强；应用包埋前染色可先定位阳性反应部位再作电镜超薄切片，获得阳性反应机率高，特别适用于含微量抗原的部位，如突触等。其不足是须经暗室显影，手续较烦杂，包埋前免疫染色易增加非特异性染色。另外，由于单个金粒周围结合的银粒不是固定的，受多种因素影响。因此，电镜免疫金粒染色法的金粒银粒计算不适于做半定量观察，误差较大。

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  1. 免疫电镜金—银法染色技术《实用免疫细胞与核酸》
  2. 免疫电镜胶体金标记法《实用免疫细胞与核酸》
  3. 免疫电泳《免疫学和免疫学检验》
  4. 免疫电镜技术在肾脏疾病中应用的意义《实用免疫细胞与核酸》
  5. 免疫电泳技术《免疫学和免疫学检验》
  6. 免疫低下者易患肿瘤《免疫与健康》
  7. 免疫反应性心肌炎《病理学》
  8. 免疫病理《病理学》
  9. 免疫方法测酶质量的临床应用《临床生物化学》
  10. 免疫标记方法《实用免疫细胞与核酸》
  11. 免疫放射分析《免疫学和免疫学检验》
  12. 免疫PCR《实用免疫细胞与核酸》
  13. 免疫辅佐细胞《免疫学和免疫学检验》
  14. 免小儿病《奇效简便良方》
  15. 免疫复合物的检测《免疫学和免疫学检验》
  16. 免身《中医词典》
  17. 免疫复合物检测的意义及应用《免疫学和免疫学检验》
  18. 免蓐《中医词典》
  19. 免疫复合物介导的炎症《免疫学和免疫学检验》
  20. 免乳《中医词典》
  21. 免疫功能的变化《病理生理学》
  22. 免怀汤《医方考》
  23. 免疫功能障碍《病理生理学》
  24. 免痘入眼《奇效简便良方》
  25. 免疫固定电泳《免疫学和免疫学检验》
  26. 棉籽和棉籽饼中毒《家庭医学百科-自救互救篇》
  27. 免疫和免疫反应《默克家庭诊疗手册》
  28. 棉子油中毒的急救《现代院外急救手册》
  29. 免疫活性细胞及其肿瘤的免疫细胞学《实用免疫细胞与核酸》
  30. 棉子疮《外科十三方考》
  31. 免疫火箭电泳法《动脉粥样硬化》

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