(一)DNA聚合酶

《实用免疫细胞与核酸》书籍目录

(DNa polymerase)的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物(primer)的3’-OH上,释放出一个焦磷酸分子(ppi),如下式表示。

聚合酶主要有以下几种:

1.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶(E.ColiDNA polymerase)主要有3种作用:①5’→3’的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA,填补DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。②3’→5’的外切酶活性。消除在聚合作用中掺入的错误核苷酸。③5’→3’外切酶活性。切除受损伤的DNA。它在切口平移(nick translation)中的应用,将在下面介绍。

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段是完整的DNA聚合酶Ⅰ的一个片段,只有在5’→3聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,失去了5’→3外切酶活性。它可用于填补DNA单链末端成为双链。如果供给32P标记的三磷酸核苷酸,则可使DNA带上同位素标记。当用交错切割的限制酶切成带有单链粘性末端的DNA片段,要用被切成平头末端的DNA片段连接时,可以先用Klenow片段使粘性末端的单链补齐成为平头,然后在DNA连接酶作用下把两个DNA片段连接起来。

另外还有大肠杆菌DNA聚合酶Ⅱ和大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ。前者不能利用单链DNA或poly(dA-dT)为模板。需有镁离子和dNTP时才能表现出酶活性,无自发合成DNA的作用。后者没有5’→3外切酶活性,也不能用单链DNA作为模板。

2.噬菌体DNA聚合酶这里以T4DNA聚合酶为例。它也具有5’→3聚合酶活性,但它的外切酶活性比大肠杆菌的要高200倍。因此,它也可用来补齐单链末端或标记同位素。

1000余本中医古籍txt电子书免费下载

下载《实用免疫细胞与核酸》 电子书打不开?

下载所有中医书籍

返回《实用免疫细胞与核酸》书籍目录
  1. DNA聚合酶《实用免疫细胞与核酸》
  2. DNA聚合酶《实用免疫细胞与核酸》
  3. DNA酶《实用免疫细胞与核酸》
  4. DNA结构的多态性《生物化学与分子生物学》
  5. DNA探针《实用免疫细胞与核酸》
  6. DNA结构的不均一性《生物化学与分子生物学》
  7. DNA探针的应用《实用免疫细胞与核酸》
  8. DNA及RNA的化学组成《基因诊断与性传播疾病》
  9. DNA限制性内切酶《实用免疫细胞与核酸》
  10. DNA复制的终止阶段《生物化学与分子生物学》
  11. DNA限制性内切酶图谱分析《生物化学与分子生物学》
  12. DNA复制的一般过程《生物化学与分子生物学》
  13. DNA限制性片段多态性连锁分析《实用免疫细胞与核酸》
  14. DNA复制的延长阶段以及参与的酶和蛋白质分子《生物化学与分子生物学》
  15. DNA修复《生物化学与分子生物学》
  16. DNA复制的起始阶段《生物化学与分子生物学》
  17. DNA指纹 与法医鉴定《实用免疫细胞与核酸》
  18. DNA分子结构《基因诊断与性传播疾病》
  19. DNA重组及基因工程技术对医学和生命科学发展的贡献《生物化学与分子生物学》
  20. DNA的重组《实用免疫细胞与核酸》
  21. DNA重组与基因工程《生物化学与分子生物学》
  22. DNA的一级结构《生物化学与分子生物学》
  23. DSA的成像基本原理与设备《医学影像学》
  24. DNA的序列测定《动脉粥样硬化》
  25. DSA的临床应用《医学影像学》
  26. DNA的损伤与修复《生物化学与分子生物学》
  27. DSA检查技术《医学影像学》
  28. DNA的损伤《生物化学与分子生物学》
  29. Duchene- Erb氏综合征《神经精神疾病诊断学》
  30. DNA的生物合成《生物化学与分子生物学》
  31. 《四圣心源》