二、研究纤维化皮损中细胞的表型特征和(或)功能状态

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(一)成纤维细胞

1.合成功能活跃除了上述对已形成胶原的分布进行观察外,利用抗体I型前胶原氨基末端的单克隆抗体,可确定新合成未加工的I型前胶原。正常人皮肤显示了真表皮交界部I型前胶原的灶性沉着。而硬皮病皮损及其未受累皮肤中,真皮上部有连续广泛的I型胶原着色。这反映了硬皮病成纤维细胞活跃的合成功能。

2.HLA-II类抗原的表达正常皮肤及正常瘢痕的成纤维细胞并不表达HLA-II类抗原。但在硬皮病、瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕中,可见许多表达HLA-II类抗原的成纤维细胞。由于HLA-II类抗原为递呈特定抗原触发免疫应答所必需,推测在上述疾病中,表达HLA-II类抗原的成纤维细胞参与了局部免疫反应。

3.细胞间粘连分子1型(ICAM-1)的表达硬皮病炎症期皮损中可见一些成纤维细胞样细胞上有ICAM-1的表达。流式细胞仪检测发现,与正常成纤维细胞相比,体外培养的硬皮病成纤维细胞中高水平表达ICAM-1的细胞比例增ICAM-1与淋巴细胞功能相关抗原1型(LFA-1)是一对配体受体系统,它们可介导成纤维细胞与T细胞结合。高水平表达ICAM-1的成纤维细胞可促使拥有LFA-1的MHC-II类限制性T辅助细胞的活化。推测由此产生能促进成纤维细胞合成细胞外基质成分的细胞因子。

(二)肌纤维母细胞

在肥厚性瘢痕以及其它一些病理情况下,存着一种具有成纤维细胞和平滑肌细胞超微结构特征的细胞,即肌纤维母细胞。其起源尚不明确。利用不同细胞骨架蛋白(波形纤维蛋白、结蛋白、α-平滑肌及α-横纹肌肌动蛋白、非肌性及平滑肌肌球蛋白)的抗体,对肌纤维母细胞的表型特征进行了研究,证实了异质性纤维母细胞群的存在。其一部分显示成纤维细胞的特征,而其余的则显示有不同程度的平滑肌分化的特征。

(三)单一核浸润细胞

在硬皮病、瘢痕疙瘩及肥厚性瘢痕中,常有不同程度单一核浸润细胞增加,弥散分布或位于血管周围。应用淋巴细胞和单核细胞的单克隆抗体检测发现,主要为T淋巴细胞和巨噬细胞。这些细胞可能通过释放某些与纤维有关的细胞因子而参与真皮纤维化的发生。此外还发现,硬皮病皮损中血管周围浸润细胞处有ICAM-1和整合素(integin)β1和β2(细胞外基质在细胞表面的受体)的免疫染色强度增加。这些细胞粘连分子在淋巴细胞迁移、定位以及粘附在细胞外基质上起重要作用。

(四)内皮细胞和肥大细胞

硬皮病皮损中,内皮细胞上ICAM-1和内皮细胞白细胞连分子1型(ELAM-1)免疫染色阳性。这两种分子的表达是内皮细胞活化的表现,它们可能与淋巴细胞附着在活化的内皮细胞上有关。硬皮病、瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕中,肥大细胞与纤维化也有密切关系。肥大细胞(MC)根据它所含中性蛋白酶的组成和含量可分为两型,一种含类胰蛋白酶(tryptase),而胃促胰酶(chymase)含量极少,即MCT;另一种则含这两种酶,即MCTC。应用这两种酶的单克隆抗体,对硬皮病皮损区MC的数量、表型和分布进行研究,结果提示MC参与了该病的发生。

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