一、脑、脊髓与垂体中神经肽的提取(以大鼠为例)
1.大鼠称重后,在尽量安静的情况下,迅速断头、取躯干血。
2.尽快取下全脑、脊髓(某段)与垂体,在沸生理盐水中煮5min,以灭活酶,保持神经肽的稳定。
3.
4.脑区等称重。
5.把脑区、垂体或脊髓,分别置于玻璃匀浆管内,加入1mol/l HAC(或HCl)1ml,充分匀浆后倒入塑料指形管中,在室温下放置100min,使生物活性物质充分溶解在酸中。
6.加入1mol/l NaOH 1 ml,中和酸。
7.离心,取上清。
8.低温(-20℃以下)保存待测。
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