一、兼并引物（DegeneratePrimer）PCR
密码子具有兼并性，如表22-4，单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的，但可以设计成对兼并引物，扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变，但核苷酸的数量应相同。兼并度越低，产物特异性越强，设计引物时应尽量选择兼并性小的氨基酸，并避免引物3’末端兼并，针对兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA的扩增、克隆和序列分析。现已成功地克隆了猪尿酸氧化酶基因、糖尿病相关肽基因和哺乳动物与禽类的嗜肝病毒基因。用脱氧肌苷（deoxyinosine；DI）引物进行PCR，可以代替编码蛋白的多种兼并密码子中的兼并碱基，DI的特异性主要受cDNA浓度影响。
表22-4 密码兼并性
| 氨基酸 | 密码子数 |
| M、W | 1 |
| C、D、E、F、H、K、N、Q、Y | 2 |
| I | 3 |
| A、G、P、T、V | 4 |
| L、R、S | 6 |
注：选择使用的肽链最好避开有4～6个密码子的氨基酸
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