九、三硝基苯磺酸(TNBS)标记核酸探针
在温和的条件下,TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5,6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物,对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便,也可用于蛋白质的标记。标记方法:取变性单链的DNA5μg,溶于0.02mol/L硼酸钠缓冲液(pH8.6)中,加入TNBS5μg溶解,在室温中反应1h。移入冰浴中,加入无水乙醇和70%乙醇各洗1次,晾干,用50μl消毒双蒸水溶解,分装,-20℃保存备用。
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