一、化学法(消化法)
1.原理
以有机混合试剂(无水乙醇、乙醇)抽提血清中磷脂,再用浓硫酸和过氯酸消化抽提液中的脂类和其他有机化合物,用硝酸盐与磷反应生成有色化合物,比色定量。本法可用组织细胞磷脂的抽提定量。
2.试剂组成
代号 | 种类 | 浓度 | 组成 | 贮2~8℃ | 有效时间 |
R-1 | 抽提液 | 无水乙醇:乙醇=3:1 | |||
R-2 | 消化液 | 用1L密器,加水约500ml,置冷水中缓缓加浓硫酸280ml到水中,冷却后加过氯酸(70%,AR)65ml,混匀,加蒸馏水至1000ml | |||
R-3 | 显色剂 | 钼酸铵(A.R)2.5g+无水醋酸钠8.2g,加蒸馏水溶解并稀释至1L,监用时取此液体9份加新配的VitC液(10%)1份,混合即可 | |||
R-4 | 参考液(贮存液)1mg/L | 称干燥KH2PO(A.R)0.4393g,溶于蒸馏水中,转移至100ml的容量中,用蒸馏水加至刻度。 | 冷藏 | ||
R-5 | 参考应用液 | 0.04mg/ml | 取贮存液2ml加至50ml容量中,加水至刻度 | 冷藏 |
3.操作
按图15-5操作。
4.计算
血清脂性磷浓度=ESA/EST×10(mg/dl)
血清磷脂(以卵磷脂计)=ESA/EST×10×0.3229(mmol/L)
图15-5 血清磷脂测定(消化法)操作图*采用带塞玻璃试管

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