第二十四章 DNA的克隆与序列测定
近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。
DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序列进行测序分析,就可以采用DNA克隆的方法,将此PCR产物连接到细菌质粒上,再进一步纯化后测序,以便鉴定脂蛋白酯酶的突变序列。
下面简要介绍DNA克隆和测序的常用方法。

- DNA的克隆与序列测定《动脉粥样硬化》
- DNA的克隆《动脉粥样硬化》
- DNA的生物合成《生物化学与分子生物学》
- DNA的聚合反应和DNA聚合酶《生物化学与分子生物学》
- DNA的损伤《生物化学与分子生物学》
- DNA的复制《基因诊断与性传播疾病》
- DNA的损伤与修复《生物化学与分子生物学》
- DNA的复制《生物化学与分子生物学》
- DNA的序列测定《动脉粥样硬化》
- DNA的复制《医学遗传学基础》
- DNA的一级结构《生物化学与分子生物学》
- DNA的分子结构《医学遗传学基础》
- DNA的重组《实用免疫细胞与核酸》
- DNA的二级结构双螺旋结构模型《生物化学与分子生物学》
- DNA分子结构《基因诊断与性传播疾病》
- DNA的变性、复性与分子杂交《生物化学与分子生物学》
- DNA复制的起始阶段《生物化学与分子生物学》
- DNA的半保留复制《生物化学与分子生物学》
- DNA复制的延长阶段以及参与的酶和蛋白质分子《生物化学与分子生物学》
- DNA超螺旋《生物化学与分子生物学》
- DNA复制的一般过程《生物化学与分子生物学》
- DNA变性《实用免疫细胞与核酸》
- DNA复制的终止阶段《生物化学与分子生物学》
- DNA《实用免疫细胞与核酸》
- DNA及RNA的化学组成《基因诊断与性传播疾病》
- Dejerine-Klumpke氏综合征《神经精神疾病诊断学》
- DNA结构的不均一性《生物化学与分子生物学》
- DEAE纤维素柱层析法《实用免疫细胞与核酸》
- DNA结构的多态性《生物化学与分子生物学》
- Dandy–Walker氏综合征《神经精神疾病诊断学》
- DNA聚合酶《实用免疫细胞与核酸》
《动脉粥样硬化》
- 第一章 脂质化学及其代谢
- 第一节 脂质种类及化学结构(缺)
- 第二节 脂质代谢
- 第三节 脂质的生理功能
- 参考文献
- 第二章 脂蛋白的组成与结构
- 第三章 载脂蛋白的种类与结构
- 第四章 载脂蛋白基因结构及其基因型
- 第五章 脂类代谢有关酶类
- 第六章 脂蛋白受体
- 第七章 脂类代谢有关的特殊蛋白质
- 第一节 胆固醇酯转移蛋白
- 第二节 血清碱性蛋白
- 一、血清碱性蛋白质的分离及其氨基酸的组成分析
- 二、血浆碱性蛋白对细胞脂质代谢的影响
- 三.不同脂质、脂蛋白和LDL-ApoB浓度下碱性蛋白对细胞代谢的影响
- 四、酰化作用剌激蛋白与细胞的连结
- 五、碱性蛋白的信使传递途径
- 六、脂肪信号Adipsin-ASP系统
- 七、HyperApoB的病理生理
- 第三节 LDL受体相关蛋白
- 第四节 微粒体甘油三酯转移蛋白
- 第五节 胆固醇调节组件结合蛋白
- 参考文献
- 第八章 脂蛋白代谢
- 第九章 自由基与细胞凋亡
- 第十章 脂类代谢紊乱
- 第一节 高脂血症
- 第二节 高脂蛋白血症
- 第三节 遗传性载脂蛋白代谢异常
- 第四节 继发性高脂蛋白血症
- 第五节 高脂血症的监控
- 参考文献
- 第十一章 动脉粥样硬化有关细胞及生物活性因子
- 第十二章 动脉粥样硬化
- 第十三章 糖尿病高脂血症与动脉粥样硬化
- 第十四章 抑扬基因表达对脂蛋白代谢及动脉粥样硬化的影响
- 第十五章 血清脂类测定
- 第十六章 血浆脂蛋白的分离纯化及定量
- 第一节 脂蛋白分离的方法学评价
- 第二节 血浆脂蛋白超速离心分离纯化法
- 第三节 血浆脂蛋白电泳分离定量法
- 第四节 血清脂蛋白非电泳定量法
- 参考文献
- 第十七章 血清载脂蛋白分离纯化及其鉴定
- 第十八章 血清载脂蛋白的免疫测定
- 第一节 血清载脂蛋白定量的方法学及其参考值的评价
- 第二节 载脂蛋白抗体的制备
- 第三节 单向免疫扩散法
- 第四节 免疫火箭电泳法
- 第五节 免疫透行射比浊法
- 参考文献
- 第十九章 载脂蛋白表型及基因型的检测
- 第二十章 低密度脂蛋白受体的检测
- 第二十一章 动脉血管壁的生化分析
- 第一节 动脉壁的组成与结构
- 第二节 动脉血管壁细胞组分的提取
- 第三节 动脉血管壁细胞间质成分的提取
- 第四节 动脉血管壁免疫化学鉴定方法
- 参考文献
- 第二十二章 动脉粥样硬化模型及细胞培养
- 第二十三章 转基因动物在动脉粥样硬化研究中的应用
- 第二十四章 DNA的克隆与序列测定
- 附录一 参考值