三、以载脂蛋白组成作脂蛋白颗粒分类
传统的脂蛋白分类是根据其密度和电泳行为分类,但是每一类脂蛋白不仅密度、大小、脂蛋白比是不均一的,载脂蛋白的组成也不同,载脂蛋白是唯一具有化学和免疫学独立特性的脂蛋白的组成部分,所以要进行准确的脂质运转研究,用传统的以物理性质分类的方法是有缺陷的。
Alaupovic提出将载脂蛋白组成作为鉴定脂蛋白颗粒的标志及脂蛋白分类的基础。每个脂蛋白颗粒只含一种载脂蛋白称为单脂蛋白,如LDL中多数脂蛋白只含ApoB100,称为脂蛋白B(LpB);若含有二种或二种以上不可分离的载脂蛋白叫复脂蛋白,如LDL中的脂蛋白颗粒含有ApoB、CI、CⅡ和CⅢ,称为LpB:CⅠ:CⅡ:CⅢ(LpB:C)。单脂蛋白和复脂蛋白是大颗粒脂蛋白体系中基本的化学实体,可以有不同的密度、大小、脂/蛋白比,但载脂蛋白的性质不变,具有特定的功能和代谢特征。
按Alaupovic提出的分类方法,ApoA和ApoB组成不同两类主要的脂蛋白颗粒,前者主要存在于HDL,而后者主要存在于VLDL和LDL中,每种都可分为单脂蛋白和复脂蛋白。含有ApoA的脂蛋白颗粒主要有LpAⅠ和LpAⅠ:AⅡ,含ApoB的脂蛋白颗粒有LpB,LpB:E,LpB:C,LpB:C:E和LpAⅡ:B:C:D:E等。
分离脂蛋白颗粒的方法主要是免疫亲和层析。
(1)含ApoA脂蛋白颗粒的分离:从ApoAⅡ抗血清提取免疫球蛋白(IgG),用抗ApoAⅡ-IgG与吸附剂交联制备免疫吸附柱,用pH7.0磷酸盐缓冲液平衡,将新鲜血清或HDL过柱,柱上保留的部分为LpAⅡ和LpAⅠ:AⅡ,滤出未保留的部分主要为Lpa Ⅰ,用3mol/L硫氰酸钠洗脱LpAⅡ和LpAⅠ:AⅡ,透析。分别将保留的部分洗脱的部分,通过抗ApoAⅠ-IgG交联的吸附柱,分离LpAⅠ、LpAⅠ:AⅡ、LpAⅡ和其他脂蛋白颗粒。用免疫扩散及免疫电泳方法鉴定LpAⅠ和LpAⅠ:AⅡ的载脂蛋白的组成。血浆中大约35~45%的ApoAⅠ存在于LpAⅠ,而55~60%存在于LpAⅠ:AⅡ,LpAⅠ占总的含ApoA脂蛋白的20~28%,LpAⅠ:AⅡ占72~80%,与LpAⅠ:AⅡ相比,LpAⅠ具有较高的胆固醇和较低的蛋白质组成,LpAⅠ和LpAⅠ:AⅡ的平均颗粒大小分别为379000和269000。
(2)含ApoB脂蛋白颗粒的分离:含ApoB脂蛋白颗粒可采用免疫亲和层析法,将VLDL和LDL中的脂蛋白颗粒分为富含胆固醇酯的LpB、LpB:E和富含甘油三酯(TG)的LpB:C,LpB:C:E和LpAⅡ:B:C:D:E等,其中LpB是主要的单脂蛋白,主要存在于LDL2中LpB:C和LpB:C:E是主要的复脂蛋白,随着密度的增加,胆固醇和胆固醇脂的含量升高而TG含量降低。
尽管对含ApoA和ApoB脂蛋白颗粒的功能和代谢研究还处在早期发展阶段,但已有许多证据表明,以载脂蛋白组成分类的脂蛋白颗粒具有功能一致性和代谢均一性,并有特定的致动脉粥样硬化(AS)作用或抗AS功效。
据报道,LpAⅠ和LpAⅠ:AⅡ具不同的功能和代谢特征。卵磷脂酯胆固醇酰基转移酶(LCAT)和胆固醇酯转运蛋白(CETP)主要存在于Lpa I而不存在LpAⅠ:AⅡ中。一项对有早发心肌梗塞家族史的青少年的研究表明,家族史与LpAⅠ有明显负相关,而与LpAⅠ:AⅡ无关,并认为,HDL抗动脉粥样硬化的功效在LpAⅠ,而不是LpAⅠ:AⅡ。含ApoB的脂蛋白颗粒,若ApoE/ApoC升高,则分解速度快。实验证明,ApoE含量升高,加快鼠灌注肝脏对富含TG脂蛋白的吸收,而ApoC则降低这一吸收;另外富含TG脂蛋白的降解速度不仅依赖于脂蛋白脂酶(LPL)的含量和活性,还与脂蛋白颗粒中LPL底物的反应性有关,如LpAⅡ:B:C:D:E的脂含量及脂蛋白质比与LpB:C和LpB:C:E很相似,而与LPL反应的速率常数比后两者低得多,水解速度慢,表明载脂蛋白组成对脂蛋白颗粒的分解代谢有重要影响。含ApoB脂蛋白颗粒也有不同的致AS作用,例如家族性高胆固醇血症(FH)病人的特点是LpB和LpB:E水平升高,LpAⅠ和LpAⅠ:AⅡ无明显变化;而高TG血症则伴随着LpB:C、LpB:c:E和LpAⅡ:B:C:D:E的升高及LpAⅠ和/或LpAⅠ:AⅡ的降低。富含TG的LpB脂蛋白颗粒也具有重要的致AS作用。如Ⅱa型病人LpB水平高。

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《动脉粥样硬化》
- 第一章 脂质化学及其代谢
- 第一节 脂质种类及化学结构(缺)
- 第二节 脂质代谢
- 第三节 脂质的生理功能
- 参考文献
- 第二章 脂蛋白的组成与结构
- 第三章 载脂蛋白的种类与结构
- 第四章 载脂蛋白基因结构及其基因型
- 第五章 脂类代谢有关酶类
- 第六章 脂蛋白受体
- 第七章 脂类代谢有关的特殊蛋白质
- 第一节 胆固醇酯转移蛋白
- 第二节 血清碱性蛋白
- 一、血清碱性蛋白质的分离及其氨基酸的组成分析
- 二、血浆碱性蛋白对细胞脂质代谢的影响
- 三.不同脂质、脂蛋白和LDL-ApoB浓度下碱性蛋白对细胞代谢的影响
- 四、酰化作用剌激蛋白与细胞的连结
- 五、碱性蛋白的信使传递途径
- 六、脂肪信号Adipsin-ASP系统
- 七、HyperApoB的病理生理
- 第三节 LDL受体相关蛋白
- 第四节 微粒体甘油三酯转移蛋白
- 第五节 胆固醇调节组件结合蛋白
- 参考文献
- 第八章 脂蛋白代谢
- 第九章 自由基与细胞凋亡
- 第十章 脂类代谢紊乱
- 第一节 高脂血症
- 第二节 高脂蛋白血症
- 第三节 遗传性载脂蛋白代谢异常
- 第四节 继发性高脂蛋白血症
- 第五节 高脂血症的监控
- 参考文献
- 第十一章 动脉粥样硬化有关细胞及生物活性因子
- 第十二章 动脉粥样硬化
- 第十三章 糖尿病高脂血症与动脉粥样硬化
- 第十四章 抑扬基因表达对脂蛋白代谢及动脉粥样硬化的影响
- 第十五章 血清脂类测定
- 第十六章 血浆脂蛋白的分离纯化及定量
- 第一节 脂蛋白分离的方法学评价
- 第二节 血浆脂蛋白超速离心分离纯化法
- 第三节 血浆脂蛋白电泳分离定量法
- 第四节 血清脂蛋白非电泳定量法
- 参考文献
- 第十七章 血清载脂蛋白分离纯化及其鉴定
- 第十八章 血清载脂蛋白的免疫测定
- 第一节 血清载脂蛋白定量的方法学及其参考值的评价
- 第二节 载脂蛋白抗体的制备
- 第三节 单向免疫扩散法
- 第四节 免疫火箭电泳法
- 第五节 免疫透行射比浊法
- 参考文献
- 第十九章 载脂蛋白表型及基因型的检测
- 第二十章 低密度脂蛋白受体的检测
- 第二十一章 动脉血管壁的生化分析
- 第一节 动脉壁的组成与结构
- 第二节 动脉血管壁细胞组分的提取
- 第三节 动脉血管壁细胞间质成分的提取
- 第四节 动脉血管壁免疫化学鉴定方法
- 参考文献
- 第二十二章 动脉粥样硬化模型及细胞培养
- 第二十三章 转基因动物在动脉粥样硬化研究中的应用
- 第二十四章 DNA的克隆与序列测定
- 附录一 参考值