一、超速离心法简介
为了研究,常需要得到脂蛋白纯品并进一步分离纯化载脂蛋白,迄至目前为止,采用密度梯度超速离心分离纯化各种脂蛋白仍是一种很好的方法。
超速离心法可分为制备型和分析型两种,根据其所用介质密度不同,可以分为等密度离心,密度梯度离心等。根据所用转头的类型不同可以分为角头、甩平头、垂直头和区带头离心法。脂蛋白分离中,采用密度梯度超速离心法较多。
离心作用是根据稳定角速度下做圆周运动的任何物质都受到一个外向的离心力F,这种力的大小取决于角速度(以弧度ω表示)和旋转半径r(以cm计算)。
F=ω2r
F常用地球引力表示,称为相对离心力(RCF)或者常用“数字×g”来表示。
RCF=ω2r/980
在使用该公式时,这些关系需用“每min转数(r/min)”表示,这是表示离心机转动速度的普通方式。
由于(r/min)的数值可转换成弧度,利用ω=π(r/min)/30公式代入上式,得到下述换算式:
RCF-(πr/min)2×r/302/980=(1.119×10-5)(r/min)2·r
对于在离心转头中旋转的样品,估计其所受到的相对离心力需要考虑样品到旋转中心的固定距离(r)。由于转头的形状设计,离心管中从管顶主管底各点旋转中心的距离是不同的。例如在固定的角式转头中,作用于离心管顶部和底部的离心力的差别接近一倍。为了计算相对离心力的数值可用平均相对离心力(RCF平均)来表示,即同一离心转头顶部和底部所受离心力的平均值。因此,最重要的将是确定半径(r)的数值。
形成密度梯度操作,可采用两种方法,一是利用自动形成器,此装置是在一根管道上装有两个容器,各以T型管与此管道相通,两容器分别装入轻液和重液,按比例进入混合器,并用蠕动泵将溶液注入超离心管内,形成不同密度液,加入到超离心管中,使其离心管中液体成密度梯度离心分布。二是采用手工操作,先配成不同密度溶液,人工一层层铺盖到超离心管内,使超离心管中成为不同密度梯度的溶夜。
超速离心后样品的收集可根据不同的实验条件采用下述几种方法。
(1)切割法:在固定的刀架上,将已离心好的样品管放在所要求的高度(按管内分离区带确定)用刀切断离心管,取出样品。
(2)虹吸法:用蠕动泵或吸管将样品从上至下逐层按区带吸出并分管收集。泵管或吸管注意每区带一管,不能混用。
(3)穿剌法:用针头在超速离心管底部穿一小孔,让液体从底部流出,并按区带分部收集。
分管收集到的各区带样品,可采用折光仪,测出折光系数,从表中查出相应溶液的水合密度,从而确认各组份的分布样品的水合密度。

- 超速离心法简介《动脉粥样硬化》
- 超声治癌《理疗学》
- 超氧化物歧化酶作用《动脉粥样硬化》
- 超声诊断仪简介《物理诊断学》
- 超正性平衡与潜病《中医疾病预测》
- 超声诊断术语《物理诊断学》
- 超正性平衡与潜病预兆《中医疾病预测》
- 超声诊断基础《物理诊断学》
- 超重和肥胖《预防医学》
- 超声诊断《物理诊断学》
- 巢氏论针眼候《秘传眼科龙木论》
- 超声与超声波《医学微生物学》
- 朝生暮落花《证类本草》
- 超声药物雾化吸入疗法《理疗学》
- 朝食暮吐《女科百问》
- 超声药物透入疗法(或称声透疗法)《理疗学》
- 朝廷对于医者之医方《医医医》
- 超声心动图诊断《医学影像学》
- 朝鲜医学发展概况《中国医学通史》
- 超声心动图检查《心脏病学》
- 朝真丹《太平惠民和剂局方》
- 超声心动图《默克家庭诊疗手册》
- 潮热《中医名词词典》
- 超声间动电疗法《理疗学》
- 潮热《伤寒标本心法类萃》
- 超声的物理特性《物理诊断学》
- 潮热《医学纲目》
- 超声的概念《物理诊断学》
- 潮热《医学纲目》
- 超声成像《医学影像学》
- 潮热《幼幼新书》
《动脉粥样硬化》
- 第一章 脂质化学及其代谢
- 第一节 脂质种类及化学结构(缺)
- 第二节 脂质代谢
- 第三节 脂质的生理功能
- 参考文献
- 第二章 脂蛋白的组成与结构
- 第三章 载脂蛋白的种类与结构
- 第四章 载脂蛋白基因结构及其基因型
- 第五章 脂类代谢有关酶类
- 第六章 脂蛋白受体
- 第七章 脂类代谢有关的特殊蛋白质
- 第一节 胆固醇酯转移蛋白
- 第二节 血清碱性蛋白
- 一、血清碱性蛋白质的分离及其氨基酸的组成分析
- 二、血浆碱性蛋白对细胞脂质代谢的影响
- 三.不同脂质、脂蛋白和LDL-ApoB浓度下碱性蛋白对细胞代谢的影响
- 四、酰化作用剌激蛋白与细胞的连结
- 五、碱性蛋白的信使传递途径
- 六、脂肪信号Adipsin-ASP系统
- 七、HyperApoB的病理生理
- 第三节 LDL受体相关蛋白
- 第四节 微粒体甘油三酯转移蛋白
- 第五节 胆固醇调节组件结合蛋白
- 参考文献
- 第八章 脂蛋白代谢
- 第九章 自由基与细胞凋亡
- 第十章 脂类代谢紊乱
- 第一节 高脂血症
- 第二节 高脂蛋白血症
- 第三节 遗传性载脂蛋白代谢异常
- 第四节 继发性高脂蛋白血症
- 第五节 高脂血症的监控
- 参考文献
- 第十一章 动脉粥样硬化有关细胞及生物活性因子
- 第十二章 动脉粥样硬化
- 第十三章 糖尿病高脂血症与动脉粥样硬化
- 第十四章 抑扬基因表达对脂蛋白代谢及动脉粥样硬化的影响
- 第十五章 血清脂类测定
- 第十六章 血浆脂蛋白的分离纯化及定量
- 第一节 脂蛋白分离的方法学评价
- 第二节 血浆脂蛋白超速离心分离纯化法
- 第三节 血浆脂蛋白电泳分离定量法
- 第四节 血清脂蛋白非电泳定量法
- 参考文献
- 第十七章 血清载脂蛋白分离纯化及其鉴定
- 第十八章 血清载脂蛋白的免疫测定
- 第一节 血清载脂蛋白定量的方法学及其参考值的评价
- 第二节 载脂蛋白抗体的制备
- 第三节 单向免疫扩散法
- 第四节 免疫火箭电泳法
- 第五节 免疫透行射比浊法
- 参考文献
- 第十九章 载脂蛋白表型及基因型的检测
- 第二十章 低密度脂蛋白受体的检测
- 第二十一章 动脉血管壁的生化分析
- 第一节 动脉壁的组成与结构
- 第二节 动脉血管壁细胞组分的提取
- 第三节 动脉血管壁细胞间质成分的提取
- 第四节 动脉血管壁免疫化学鉴定方法
- 参考文献
- 第二十二章 动脉粥样硬化模型及细胞培养
- 第二十三章 转基因动物在动脉粥样硬化研究中的应用
- 第二十四章 DNA的克隆与序列测定
- 附录一 参考值