三、高密度脂蛋白亚组份胆固醇(HDL2-C,HDL3-C)检测
聚乙二醇20000沉淀法
1.原理:
HDL中主要组份为HDL2和HDL3。用聚乙二醇20000(PEG20000)作沉淀剂,以不同浓度在不同pH条件下,可将HDL2和HDL3分离开。95g/L聚乙二醇20000在pH6.5环境下可将血清中低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)沉淀,离心后上清液中只含HDL。170g/L聚乙二醇20000在pH7.5环境中,可将LDL、VLDL、HDL2沉淀,离心后上清液中只含HDL3,以酶试剂侧定各自上清液中胆固醇含量,通过换算,计算出代表HDL各亚组分含量。
2.试剂:沉淀剂Ⅰ:95g/L PEG20000,pH6.5
沉淀剂Ⅱ:170g/LPEG20000,pH7.5。
胆固醇酶应用液及参考血清以试剂盒而定。
3.操作方法:(以生化分析仪为例)按表16-3操作
表16-3 HDL-C亚组分测定操作步骤
加入物 | 1管 | 2管 |
血清 | 100 | 100 |
沉淀剂Ⅰ(μl) | 200 | - |
沉淀剂Ⅱ(μl) | - | 200 |
置混匀器上混匀2min,置室温10min,3000r/min离心20min,上清液待测。
上清液于生化分析仪测定,测定参数参照总固醇测定法。
5.结果计算
HDL-C=上机测得结果×血清稀释倍数
HDL3-C=上机测得结果×血清稀释倍数
HDL2-C=HDL-C×HDL3
6.注意事项:
离心时间及速度一定要准确;
离心上清液混浊者应继续离心直到清亮止;

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《动脉粥样硬化》
- 第一章 脂质化学及其代谢
- 第一节 脂质种类及化学结构(缺)
- 第二节 脂质代谢
- 第三节 脂质的生理功能
- 参考文献
- 第二章 脂蛋白的组成与结构
- 第三章 载脂蛋白的种类与结构
- 第四章 载脂蛋白基因结构及其基因型
- 第五章 脂类代谢有关酶类
- 第六章 脂蛋白受体
- 第七章 脂类代谢有关的特殊蛋白质
- 第一节 胆固醇酯转移蛋白
- 第二节 血清碱性蛋白
- 一、血清碱性蛋白质的分离及其氨基酸的组成分析
- 二、血浆碱性蛋白对细胞脂质代谢的影响
- 三.不同脂质、脂蛋白和LDL-ApoB浓度下碱性蛋白对细胞代谢的影响
- 四、酰化作用剌激蛋白与细胞的连结
- 五、碱性蛋白的信使传递途径
- 六、脂肪信号Adipsin-ASP系统
- 七、HyperApoB的病理生理
- 第三节 LDL受体相关蛋白
- 第四节 微粒体甘油三酯转移蛋白
- 第五节 胆固醇调节组件结合蛋白
- 参考文献
- 第八章 脂蛋白代谢
- 第九章 自由基与细胞凋亡
- 第十章 脂类代谢紊乱
- 第一节 高脂血症
- 第二节 高脂蛋白血症
- 第三节 遗传性载脂蛋白代谢异常
- 第四节 继发性高脂蛋白血症
- 第五节 高脂血症的监控
- 参考文献
- 第十一章 动脉粥样硬化有关细胞及生物活性因子
- 第十二章 动脉粥样硬化
- 第十三章 糖尿病高脂血症与动脉粥样硬化
- 第十四章 抑扬基因表达对脂蛋白代谢及动脉粥样硬化的影响
- 第十五章 血清脂类测定
- 第十六章 血浆脂蛋白的分离纯化及定量
- 第一节 脂蛋白分离的方法学评价
- 第二节 血浆脂蛋白超速离心分离纯化法
- 第三节 血浆脂蛋白电泳分离定量法
- 第四节 血清脂蛋白非电泳定量法
- 参考文献
- 第十七章 血清载脂蛋白分离纯化及其鉴定
- 第十八章 血清载脂蛋白的免疫测定
- 第一节 血清载脂蛋白定量的方法学及其参考值的评价
- 第二节 载脂蛋白抗体的制备
- 第三节 单向免疫扩散法
- 第四节 免疫火箭电泳法
- 第五节 免疫透行射比浊法
- 参考文献
- 第十九章 载脂蛋白表型及基因型的检测
- 第二十章 低密度脂蛋白受体的检测
- 第二十一章 动脉血管壁的生化分析
- 第一节 动脉壁的组成与结构
- 第二节 动脉血管壁细胞组分的提取
- 第三节 动脉血管壁细胞间质成分的提取
- 第四节 动脉血管壁免疫化学鉴定方法
- 参考文献
- 第二十二章 动脉粥样硬化模型及细胞培养
- 第二十三章 转基因动物在动脉粥样硬化研究中的应用
- 第二十四章 DNA的克隆与序列测定
- 附录一 参考值