人胎盘血白蛋白制造及检定规程

本品系由健康人胎盘血液经盐析、辛酸钠处理的方法或卫生部批准的其他适宜方法提取，经60℃10小时加温灭活病毒素制成。白蛋白含量96%以上，含适宜的稳定剂，不含防腐剂和抗生素，专供静脉输注。主要用于治疗创伤性、失血性休克，严重烧伤以及低蛋白血症等。

1　制造

1.1　制造要求

1.1.1　胎盘及血液（包括脐带和胎盘后血）必须取自健康产妇。凡患传染性肝炎、恶性肿瘤、免疫缺陷症、艾滋病、性病（梅毒、淋病）及急性传染病尚未恢复的产妇分娩之胎盘，以及人工流产、死胎、各种畸形儿之胎盘与血液均不得使用。

1.1.2　胎盘应于娩出后立即由接生人员用无菌操作手续放入无菌容器内，并立即冷藏（10℃以下），在收集运输过程中也应冷藏。

1.1.3　胎盘血应采用敏感性为1ng/ml以下的试剂盒逐只进行HBsAg检查、梅毒检查、HIV-1、HIV-2抗体和HCV抗体检查，阴性者方可投入生产，投产之胎盘，自娩出至开始投产一般不应超过48小时（如特殊情况可延长至72小时）。冰冻胎盘（-15℃以下）应在2个月内投产。

1.1.4　制造工作室及各种生产用具必须专用，严禁与其他异种蛋白质混用。

1.1.5　在制造过程中应采取各种有效措施防止制品污染热原质。如操作室温度应不超过25℃，注意无菌操作，接触制品的各种用具用前须经除热原质处理，用后应立即洗净。

1.1.6生产用水应符合饮用标准，直接用于制品的水应符合注射用水标准。所用各种化学药品应符合《中国生物制品主要原材料试行标准》，未纳入试行标准者应不低于化学纯。硫酸铵也可用粗制品自行加工提纯，提纯后铁盐、重金属、砷盐的含量亦应达到上述要求。饱和硫酸铵溶液的比重在20℃时为1.245。

1.2　制造工艺

1.2.1　采用硫酸铵盐析、酸沉淀以及辛酸钠保护下的热处理等步骤，自胎盘浸液中提取白蛋白，并结合适宜的吸附剂吸附，或低温乙醇分段沉淀等处理步骤进一步提纯。亦可用卫生部批准的其他适宜方法。应含适量的稳定剂（每g蛋白质加0.16mmol辛酸钠或0.08mmol辛酸钠和0.08mmol乙酰色氨酸钠）。

1.2.2　热处理

每批制品经60±0.5℃加温10小时处理。热处理可在除菌过滤前或分装后24小时内进行。

1.2.3　分批

同一制造工艺、同一容器混合的制品作为一批。不同滤器除菌过滤或不同机柜冻干的制品应分为亚批。

1.2.4　半成品检定

液体制剂于除菌过滤后应做理化检查及热原质试验，并应按亚批抽样做无菌试验。

1.2.5　冻干

除菌过滤后，制品应及时分装、旋冻，并按《人血白蛋白制造及检定规程》1.2.5项规定进行冻干。

1.3　剂型与规格

1.3.1　剂型分为液体及冻干两种。

1.3.2　规格

液体制剂蛋白质浓度可分为5%、10%、20%或25%四种，每瓶蛋白质装量为2g，5g及10g。冻干制剂每瓶蛋白质装量为5g和10g。

1.4　制品重滤和再制

1.4.1　无菌试验不合格，无肉眼可见混浊或沉淀，可立即再除菌过滤一次。

1.4.2　理化检查或热原质试验及豚鼠离体回肠收缩试验不符合规定的制品，允许用适当方法加工再制一次。

1.4.3　经过重滤或再制的制品均应重新进行检定，并根据不同的再制方法，可增加必要的质量检查项目。

1.4.4　再制品的效期应按混合的各批中最早一批的效期计算。

1.5液体制剂分装后，应放置20～35℃至少14天逐瓶检查，应符合外观规定。

2　成品检定

2.1　抽样

每批成品应抽样做全面质量检定，不同机柜冻干的制品应分别抽样做无菌试验及水分测定。

2.2　物理检查

2.2.1　外观

冻干制剂应为灰白色疏松体，无融化迹象。液体制剂和冻干制剂重溶后应为略粘稠，黄色或黄褐色澄明液体，不应有异物、混浊或沉淀。

2.2.2　真空度

冻干制剂以高频火花真空测定器检测，瓶内应出现蓝紫色辉光。

2.2.3　溶解时间

冻干制剂溶解成10%（g　/ml）蛋白质浓度时，其溶解时间不应超过15分钟。

2.2.4　热稳定性试验（液体制剂）

取检品一瓶（支），放入57±0.5℃水浴保温50小时后，与同批未保温的另一瓶（支）检品比较，除颜色有轻微变化外，应无肉眼可见的变化。

2.3　化学检定

按《生物制品化学检定规程》进行。

2.3.1　水分

冰干制剂水分含量应≤1%（g/g）。

2.3.2pH值

以生理盐水稀释成1%蛋白质浓度，在20±2℃测定，pH值应为6.4～7.4。

2.3.3　蛋白质含量

用钨酸沉淀法测定。蛋白质含量应不低于标示量的95%。每瓶蛋白质的总量应不低于出品规格。

2.3.4纯度

白蛋白含量应不低于蛋白质总量的96%。

2.3.5　残余硫酸铵含量

若末次沉淀系采用硫酸铵盐析的制品，残余硫酸铵含量应不超过0.05%(g/ml)。

2.3.6　钠离子测定

钠离子含量应≤160mmol/L。

2.3.7　铝离子测定

如用氢氧化铝吸附处理的制品，其残余铝离子含量应≤50μg/g蛋白质。

2.3.8钾离子测定

钾离子含量应≤160mmol/L。

2.3.9　吸收度测定

1%蛋白质溶液在1cm比色池403nm波长下测定吸收收度，应≤0.15。

2.3.10　多聚体含量

多聚体含量应≤5%。

2.3.11　辛酸钠含量

辛酸钠含量应≤0.18mmol/g蛋白质。

2.4HBsAg测定

用敏感性为1ng/ml以下的试剂盒测定，应为阴性。

2.5鉴别试验

用免疫双扩散法。仅与抗人的血清产生沉淀线，与抗马、抗牛的血清不产生沉淀线。

2.6　无菌试验

按《生物制品无菌试验规程》进行

2.7　安全试验

2.7.1　豚鼠试验

取体重300～400g健康豚鼠2只，每只皮下注射检品5ml，注射后半小时内动物不应有明显的异常反应，观察7天，动物均应健存，每只体重增加，无局部脓肿、坏死或结痂者，判为合格。体重不增加时，可继续观察7天。体重上升，无上述局部反应时可判为合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠复试一次，判定标准同前。

2.7.2小白鼠试验

取体重18～20g小白鼠5只，每只腹腔注射检品0.5ml，半小时内动物不应有明显的异常反应，继续观察7天，动物均健存，每只体重增加者判为合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠复试一次，判定标准同前。

2.8　热原质试验

按《生物制品热原质试验规程》进行。注射剂量按家兔体重注射0.75g/kg。判定标准按该规程4.2项要求进行。

2.9　豚鼠离体回肠收缩试验

取体重350～500g健康豚鼠解剖，取出回肠，剪下约3～4cm肠段。浸沉于台氏液中，供给空气，保持水恒温（±0.5℃，水浴温度可在30～36℃之间任选一个温度），待稳定后，先用阳性、阴性对照样品检查肠段的敏感度，阳性对照应使肠段收缩峰高约1cm。然后注入检品（检品中所含的蛋白质mg数与台氏液容积ml数比值为1∶1～2∶1），观察1～2分钟，以2只豚鼠的各一个肠段的反应与阴性对照相同者为合格。如两只豚鼠的肠段中有一个有反应，可另取一只豚鼠的肠段进行检查，阴性者为合格，否则判为不合格。

3　保存与效期

液体制剂保存于2～8℃暗处，冻干制剂应严格保存于10℃以下避光干燥处。自浸渍胎盘之日起效期为5年。