附录6 类A血型物质测定法(血凝抑制法)

《中国生物制品规程》书籍目录

1 试剂

1.1抗A血型血清

1.2A血型物质:制备一标准溶液,含量1mg/ml,由中国药品生物制品检定所分发或经其认可。

1.31%A型红细胞(悬于生理盐水,6人份混合)。

2 方法

2.1抗A血型血清试验剂量的测定

准备一组10支9mm直径试管,将抗A血型血清用生理盐水进行2倍系列稀释,体积为0.1ml,由1/2稀释度开始,加1%A型人红细胞0.1ml。同时以0.1ml盐水和0.1mlA型红细胞作阴性对照。摇匀,室温放置15分钟,1500r/min离心1分钟,按细胞沉降压缩情况观察凝集程度。抗A血型血清的最高稀释度仍呈现4+完全凝集(在摇匀后,红细胞沉降物必须保持不受触动)者含一个抗体试验剂量。

2.2制品中A血型物质的滴度

准备一组10支9mm直径试管,将样品用生理盐水进行2倍系列稀释,体积为0.1ml,由原倍样品开始。

A血型物质对照:准备一组10支9mm直径试管,将A血型物质标准液用生理盐水进行2倍系列稀释,体积为0.1ml,由1/100稀释度(0.01mg/ml)开始。

于每稀释度样品及A血型物质标准溶液中加0.1ml含2个试验剂量抗A血型血清。摇匀,置37±0.5℃10分钟,再于上述各管中加入1%A型人红细胞,摇匀,37±0.5℃放置15分钟,1500r/min离心1分钟,按红细胞沉降压缩情况观察凝集程度。

3 结果计算及判定限度

3.1计算

将样品呈现完全血凝抑制(终点)的最高稀释倍数乘以对照组呈现相似血凝抑制的最高倍稀释管的血型物质含量,即为每ml样品所含类A血型物质的mg数。

3.2判定限度

制品中类A血型物质含量不得超过0.004mg/ml。

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