二、克隆酶供体免疫测定
利用重组DNA技术制备β-半糖苷酶的两个片段:大片段称为酶受体(enzymeacceptor,EA),小片段称为酶供体(enzymedonor,ED)。两个片段本身均不具酶活性,但在合适的条件下结合在一起就具有酶活性。利用这两相片段的特性建立的均相酶免疫测定称为克隆酶供体免疫测定(clonedenzymedonorimmunoassay,CEDIA)。CEDIA的反应模式为竞争法,测定原理为:标本中的抗原和ED标记的抗原与特异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物。ED标记的抗原与抗体结合后由于空间位阻,不再能与EA结合。反应平衡后,剩余的ED标记抗原与EA结合,形成具有活性的酶(图15-3)。加入底物测定酶活力,酶活力的大小与标本中抗原含量成正比。CEDIA主要用于药物和小分子物质的测定。
图15-3CEDIA原理示意图
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