第六节 酶免疫测定的应用

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酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试剂盒和自动或半自动检测仪器的问世。酶免疫测定步骤复杂,试剂制备困难。只有用符合要求的试剂和标准化的操作,才能获得满意的结果。

商品ELISA试剂盒中应包含包被好的固相载体、酶结合物底物和洗涤液等。先进的试剂盒不仅提供全部试剂成分,而且所有试剂均已配制成应用液,并在各种试剂中加色素,使之呈现不同的颜色。ELISA操作步骤多,所需试剂也多,这种有色试剂既方便操作又有利于减少操作错误。ELISA所有仪器除定量测定中必需的出色仪(专用的称为ELISA测读仪)外,洗涤板也极有用。洗涤机的使用不仅省时省工,而且也利于操作标准化,对中小型实验室是实用且易于接受的。但应注意在采用洗板机前,应先对洗板机的性能加以检定,确认各孔的洗涤效果是否彻底,且重复性好。

半自动和自动化ELISA分析仪亦趋成熟,并在大中型临床检验实验室中取得应用。自动化ELISA分析仪有开放系统(opensystem)和封闭系统(closesystem)两类。前者适用于所有的96孔板的ELISA测定;后者只与特定试剂配套使用。

均相酶免疫测定主要用于药物和小分子物质的检测。ELISA则应用更为广泛,可用以检测的项目包括以下几个方面:

1.病原体及其抗体广泛应用于传染病的诊断。病毒肝炎病毒、风疹病毒、疱疹病毒、轮状病毒等;细菌如链球菌、结核分枝杆菌、幽门螺杆菌和布氏杆菌等;寄生虫如弓形体、阿米巴、疟原虫等。

2.蛋白质各种免疫球蛋白、补体组分、肿瘤标志物(例如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特异性抗原等)、各种血浆蛋白质、同工酶(如肌酸激酸MB)、激素(如HGG、FSH、TSH)。

3.非肽类激素如T3、T4、雌激素、皮质醇等。

4.药物和毒品如地高辛、苯巴比妥、庆大霉素、吗啡等。

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  1. 酶免疫测定的应用《免疫学和免疫学检验》
  2. 酶类标志物《临床生物化学》
  3. 酶免疫技术的分类《免疫学和免疫学检验》
  4. 酶扩大免疫测定技术《免疫学和免疫学检验》
  5. 酶免疫技术的分类《免疫学和免疫学检验》
  6. 酶活性增高引起的遗传性酶病《医学遗传学基础》
  7. 酶浓度对反应速度的影响《生物化学与分子生物学》
  8. 酶活性降低引起的遗传性酶病《医学遗传学基础》
  9. 酶桥法《实用免疫细胞与核酸》
  10. 酶活性的浓度单位《临床生物化学》
  11. 酶系统《病理学》
  12. 酶活性测定条件的选择和限定《临床生物化学》
  13. 酶消化液《实用免疫细胞与核酸》
  14. 酶活性测定的常用技术和方法《临床生物化学》
  15. 酶原《生物化学与分子生物学》
  16. 酶活力测定《临床生物化学》
  17. 酶作用高效率的机理《生物化学与分子生物学》
  18. 酶含量调节《生物化学与分子生物学》
  19. 酶作用在于降低反应活化能《生物化学与分子生物学》
  20. 酶分子降解的调节《生物化学与分子生物学》
  21. 霉变甘蔗中毒《家庭医学百科-自救互救篇》
  22. 酶分子化学修饰调节《生物化学与分子生物学》
  23. 霉疮《古今医案按》
  24. 酶法(GK-GPO-POD比色法)《动脉粥样硬化》
  25. 霉酱色苔舌总论《伤寒舌鉴》
  26. 酶法(CEH、COD-POD法)《动脉粥样硬化》
  27. 霉菌毒素《临床营养学》
  28. 酶法《动脉粥样硬化》
  29. 霉菌无菌试验培养基灵敏度试验法《中国生物制品规程》
  30. 酶法《动脉粥样硬化》
  31. 霉菌性阴道炎《中医词典》

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