(二)竞争法
有报道用况争法检测IL-2水平。用免抗IL-2PcAb包袱板子,同时加入125I标记的IL-2和待测IL-2,根据γ计数cpm值得知待检IL-2对125I-IL-2与PcAb竞争结合的程度,从而推算出待测标本IL-2的含量。这种方法检测IL-2的敏感性可达50pg/ml。
为了增加敏感性,在上述系统中可再连接上生物素,再用链霉亲和素(streptavidin)酶标记物进行放大。此外,还可用化学发光、改进显色底物等措施提高检测方法的敏感性。
表4-23 细胞因子生物学活性与免疫学检测方法的比较
生物学活性法 | 免疫学检测法 | |
原理 | 细胞因子特定的 | 细胞因子与相应抗体 |
生物学活性 | 特异性结合反应 | |
结果表示 | 生物学活性水平 | 含 量 |
敏感性 | 一般较高 | 一般较低 |
(与细胞表面高亲和力受体有关) | (加放大系统可明显升高) | |
特异性 | 低 | 高 |
(识别类型、亚型) | (不能) | (不可能) |
周 期 | 较 长 | 短 |
受实验条件影响 | ||
培养条件 | 大 | 小 |
指示细胞敏感性差异 | 大 | / |
指示细胞突变 | 可发生 | / |
生物学作用相同因子干扰 | 大 | 小 |
样品中特异性或非特异性 | 大 | 小 |
抑制物干扰 | ||
重复性 | 较 差 | 较 好 |
标准化、大量检测 | 困 难 | 容 易 |
- 竞争法《细胞和分子免疫学》
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