(二)竞争法

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有报道用况争法检测IL-2水平。用免抗IL-2PcAb包袱板子,同时加入125I标记的IL-2和待测IL-2,根据γ计数cpm值得知待检IL-2对125I-IL-2与PcAb竞争结合的程度,从而推算出待测标本IL-2的含量。这种方法检测IL-2的敏感性可达50pg/ml。

为了增加敏感性,在上述系统中可再连接上生物素,再用链霉亲和素(streptavidin)酶标记物进行放大。此外,还可用化学发光、改进显色底物等措施提高检测方法的敏感性。

表4-23 细胞因子生物学活性与免疫学检测方法的比较

 生物学活性法免疫学检测法
原理细胞因子特定的细胞因子与相应抗体
 生物学活性特异性结合反应
结果表示生物学活性水平含 量
敏感性一般较高一般较低
 (与细胞表面高亲和力受体有关)(加放大系统可明显升高)
特异性
(识别类型、亚型)(不能)(不可能)
周 期较 长
受实验条件影响  
培养条件
指示细胞敏感性差异
指示细胞突变可发生
生物学作用相同因子干扰
样品中特异性或非特异性
抑制物干扰  
重复性较 差较 好
标准化、大量检测困 难容 易

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