十二、实验动物的处死方法

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(一)蛙类

常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊椎的方法处死。将蛙用温布包住,露出头部,左手执蛙,并且用食指按压其头部前端,拇指按压背部,使头前俯;右手持金属探针由头前端沿线向尾方刺触,触及凹陷处即枕骨大孔所在。将探针由凹陷处垂直刺入,刺破皮肤即入枕骨大孔。这时将探针尖端转向头方,向前探入颅腔,然后向各方搅动,以捣毁脑组织,如探针确在颅腔内,实验者可觉出针在四面皆壁的腔内。脑组织捣毁后,将探针退出,再由枕骨大孔刺入,并转向尾方,与脊柱平行刺入椎管,以破坏脊髓。脑和脊髓是否被完全破坏,可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。拔出探针后,用一小干棉球将针孔堵住,以防止其出血。

操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内。如被射入时,即需立即用生理盐水冲洗眼睛。

(二)大鼠和小鼠

1.脊椎脱臼法

右手抓住鼠用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓与脑髓拉断,鼠便立即死亡。

2.断头法

实验者戴上棉绿纱手套,用右手握住大鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。小鼠处死法相同。

3.击打法

右手抓住鼠尾,提起,用力摔击其头部,鼠痉挛后立即死亡。用小木锤用力击打鼠头部也可致死。

4.急性大失血法

可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使鼠立即死亡。

5.化学致死法

吸入一氧化碳,大、小鼠在一氧化碳浓度为0.2-0.5%环境中即可致死。

皮下注射士的年,吸入乙醚、氨仿,均可致死。士的年注射量,小鼠为0.76~2.0mg/kg体重,大鼠3.0-3.5ml/kg体重。氯化钾处死大鼠剂量:25%溶液0.6ml/只静脉注入。

(三)狗、猫、兔、豚鼠

1.空气栓塞

向动物静脉内注入一定量的空气,使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后,可在右心随着心脏的跳动使空气与血液相混致血液成泡沫状,随血液循环到全身。如进入肺动脉,可阻梗其分支,进入心脏冠状动脉,造成冠状动脉阻塞,发生严重的血液循环障碍,动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入20-40ml空气即可致死。每条狗由前肢或后肢皮下静脉注入80~150ml空气,可很快致死。

2.急性失血法

先使动物轻度麻醉,如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥纳20-30mg,动物即很快入睡。暴露股三角区,用锋利的杀狗刀在股三角区作一个约10cm的横切口,把股动、静脉全切断,立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切周围处的血液和血凝块,同时不断的用自来水冲洗流血,使股动脉切口处保持畅通,动物3~5分钟内即可致死。采用此种方法,动物十分安静,对脏器无损伤,对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法。

3.破坏延脑法

如果急性实验后,脑已暴露,可用器具将延髓破坏,导致动物死亡。对家兔也可用木锤用力锤击其后脑部,损坏延脑,造成死亡。

4.开放性气胸

将动物开胸,造成开放性气胸。这时胸膜腔的压力与大气压力相等,肺脏因受大气压缩发生肺萎陷,纵隔摆动,动物窒息而死。

5.化学药物致死法

静脉内注入一定量的氯化钾溶液,使动物心肌失去收缩能力,心脏急性扩张,致心脏驰缓性停跳而死亡。每条成年兔由兔耳缘静脉注入10%氯化钾溶液5~10ml;每条成年狗由狗前肢或后肢下静脉注入20~30ml。即可致死。

静脉内注入一定量的福尔马林溶液,使血液内蛋白凝固,动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死。每条成年狗静脉注入10%福尔马林溶液20ml即可致死。也可将福尔马林与酒精按一定比例配成动物致死液应用。

皮下注射士的年致死:豚鼠剂量为3.0-4.4mg/kg体重,兔0.5-0.5mg/kg体重,狗0.3-0.42mg/kg体重,猫1.0-2.0mg/kg体重。

经口或注年DDT致死;(LD50):豚鼠:经口0.4g/kg体重,皮下0.9g/kg体重。兔:经口0.3g/kg体重,皮下0.25g/kg体重;静脉0.043g/kg体重。狗:静脉0.067g/kg体重。

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