一、动物实验的常用方法
在医学教学、科研和医学工作中,不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物实验方法已成为医学科学研究和教学工作中必不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
动物实验按机体水平不同的可分为整体实验和离体实验两种,还可进一步具体地分为亚细胞、细胞、组织、器官,整体动物和无损伤动物等水平的实验。按动物实验的时间长短可分为急性实验(2天以内)、亚急性实验(1~4周)和慢性实验(2~6个月或更长时间甚至整个生命期)。
动物实验的方法很多,如有生理学的动物实验方法;病理生理学的动物实验方法;药理学的动物实验方法;病理解剖学、组织学的动物实验方法;微生物学和免疫学的动物实验方法等等。下面举一些动物实验的常用方法:
1.复制动物模型法此法是动物实验最基本的方法,是采用人工的方法使动物在一定致病因素(机械、化学、生物和物理)作用下,造成动物的组织,器官或全身的一定损伤,复制成与人类疾病相似的动物疾病模型,来研究各种疾病的发生、发展规律及防治方法。
2.切开、分离法此法是以活体动物为对象的整体实验常用方法。习惯上把在麻醉情况下,制备一些实验条件(如活体解剖、分离暴露器官、组织或进行一些手术制备等措施)进行研究者称“急性动物实验”。其优点是比较简便,操作后可以即进行观察,实验条件相对地较易控制,对要研究的器官,有可能直接观察。但存在着麻醉、手术创造及存活时间较短等因素,也会对实验结果带来一定的影响。因此采用此法应注意麻醉深度更适中,手术要轻巧,少出血、减少创伤,并要熟悉手术部位的神经、血管等解剖。
3.切除和注入提取液法常用于研究内分泌器官的生理和病理病变,如研究切除某一腺体后看辐射对机体的影响,切除某一腺体后看出现什么症状而推论这种腺体的功能;如蝌蚪无甲状腺素,如注入甲状腺素,蝌蚪很快变成了蛙。
4.离体组织器官法离体实验是利用动物的离体组织、器官或生物性致病因子(微生物、寄生虫等),置于一定的存活条件下(如温度、营养成分、氧气、水、pH等)进行观察的一种实验方法。如可利用离体肠管观察药物对肠管动物、吸收、通透性、血流情况等的影响,并进行作用机理的分析;利用离体胆囊来筛选引起胆囊舒缩的药物;利用大肠杆菌或其它细菌进行药物敏感性实验。寻找抑制细菌生长的药物,并研究其作用规律,以便为胆道感染的防治提供线索。动物组织、细胞的培养也常用此种方法。离体实验的优点是方法比较简单,一般不需要很复杂的仪器设备。实验条件比较容易控制,牵涉的人力较少,因此常被列为分析性研究的一种手段。不足之处是模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入,其结果也往往与体内的变化有一定距离,因此可以作为整体研究的补充和参考。
5.瘘管法用无菌手术方法给动物造成不同的人造瘘管如胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液腺瘘管、食道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管可以收集内脏液体,是生理学消化研究的主要方法。此种方法是慢性动物实验所常用的方法。慢性动物实验一般是先在无菌操作下制备好实验模型(瘘管法是其中一种),待动物恢复健康后进行研究。这类研究方法的优点在于被研究的对象,其机体内外环境已处于较自然的相对平衡状态,条件比较稳定,所得的结果接近生理情况。但需要事先制备,术后护理,等动物恢复健康后才能从事实验,花费时间较长,工作量较大,因而在选用上受到一定限制。除了用手术制备的动物实验外,运用药物或食铒等措施制备病理模型,如诱发各种实验性动物疾病模型的方法也可归为慢性动物实验。
6.移植法一般是将动物的器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。如骨髓移植时,将小鼠A(供体)的骨髓注入到小鼠B的血液中(受体),很快可见脾结节化(脾造血)。脾结节的数量反应了造血干细胞的多少,由此可以观察干细胞的变化。各小鼠之间的骨髓移植叫同种骨髓移植,同一品系小鼠内各小鼠之间的骨髓移植叫同系骨髓,小鼠骨髓移植给大鼠则叫异种骨髓移植。动物各种组织、器官的移植也是实验研究中常用的方法。
7.生物电、活性观察法对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观察记录,如心电、肌电、脑电等;对动物组织中各种活动物质用生物化学法测定,如各种酶,激素等。
8.病理解剖学、组织学观察法采用肉眼观察、光镜和电镜检查,来观察、分析动物各种疾病时病理组织学改变。可从组织学的角度来探讨疾病防治机理,例如通过阑尾组织节片和肉眼观察,分析口服中药、针刺或局部敷药对有炎症阑尾的影响,阐明不同证型时阑尾变化的病理学特点以及某些病人用中西医结合非手术治疗后复发的原因。近年来由于电子显微技术的进展,不仅可以观察到病变时细胞内细胞器等亚细胞结构的变化,而且也可以运用电子扫描方法对动物器官的微小结构进行完整的表层观察。
9.免疫学观察法注入抗原使动物致敏,制备各种抗血清,如常选用新西兰或大白耳家兔制备病原体免疫血清、间接免疫血清、抗补体抗体血清、抗组织免疫血清等。采用免疫荧光技术、酶标记免疫技术、放射免疫测定技术、免疫电镜技术等对动物免疫后各种免疫变化进行检查。
10.其它方法如联体动物法,条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学等等。
动物实验的基本操作技术方法,根据实验顺序分述如下:

- 动物实验的常用方法《实验动物科学》
- 动物模型的应用《中国幽门螺杆菌研究》
- 动物饲养密度《实验动物科学》
- 动物模型的意义和优越性《实验动物科学》
- 动物饲养室工作制度《医院药学》
- 动物模型《动脉粥样硬化》
- 动物选择《实验动物科学》
- 动物甲状腺中毒《家庭医学百科-自救互救篇》
- 动物疫源菌《医学微生物学》
- 动物肝急性中毒的急救《现代院外急救手册》
- 动物营养《实验动物科学》
- 动物的选择与应用《实验动物科学》
- 动物源性传染病《家庭医学百科·预防保健篇》
- 动物的选择与应用《实验动物科学》
- 动物脏器粉末吸收法《实用免疫细胞与核酸》
- 动物的选择与免疫《实用免疫细胞与核酸》
- 动物肿瘤模型的选择《实验动物科学》
- 动物的类群《实验动物科学》
- 动眼神经《人体解剖学》
- 动物病毒载体《生物化学与分子生物学》
- 动眼神经、滑车神经、外展神经损害《神经精神疾病诊断学》
- 动态心电图《心脏病学》
- 动眼神经麻痹《神经精神疾病诊断学》
- 动态条件下的肺通气《急诊医学》
- 动摇《证治准绳·类方》
- 动态食管测压《胃肠动力检查手册》
- 动阴血《医学心悟》
- 动态γ计数检测《胃肠动力检查手册》
- 动与代对《三指禅》
- 动胎腰腹痛方三首《外台秘要》
- 动员局部脂肪分解及其他药物《减肥新法与技巧》
《实验动物科学》
- 第一章 实验动物科学绪论
- 第一节 研究范围和发展意义
- 第一节 国内外实验动物科学发展情况
- 第二节 实验动物科学在生物医学发展中的作用
- 第三节 动物的类群和生物学分类上的位置
- 第四节 实验动物的分类方法
- 第二章 常用实验动物的特点及应用
- 第一节 小鼠(Mouse;Musculus)
- 第二节 大鼠(Rat;Rattus norregicus)
- 第三节 豚鼠(Guine-pig;Cavia porcellus)
- 第四节 地鼠(Hamster)
- 第五节 家兔(Rabbit,Oryctolagus curiculus)
- 第六节 狗(Dog;Canis familiaris)
- 第七节 猴(Monkeys)
- 第八节 猫(Cat;Felis Catus)
- 第九节 猪(Swine;Sus scrofa)和小型猪
- 第十节 其他实验动物
- 第三章 近交系动物的特点及应用
- 第一节 近交和近交系
- 第二节 近交系的特征和应用意义
- 第三节 近交系的培育技术
- 第四节 近交品系的命名法
- 第五节 近交系的新进展
- 第六节 常用近交系动物品系特征
- 第四章 突变系动物的特点及应用
- 第一节 突变系动物的基本概念
- 第二节 突变品系的模型性状
- 第三节 带病理模型性状的突变株
- 第四节 突变基因的特点
- 第五节 无胸腺裸鼠特点及应用
- 第五章 杂交群和封闭群动物的特点及应用
- 第一节 杂交群动物(F1)的特点及应用
- 第二节 封闭群动物的特点及应用
- 第六章 无菌动物、悉生动物和无特定病原体动物的特点及应用
- 第一节 无菌动物
- 一、无菌动物的基本概念
- 二、无菌动物的发展
- 三、无菌动物的特征
- 四、无菌动物技术
- 五、无菌动物的饲料和饲育装置
- 六、无菌动物的检查
- 七、无菌动物在生物医学研究中的应用
- 第二节 悉生动物
- 第三节 无特定病原体动物
- 第七章 野生动物在生物医学研究中的应用
- 第一节 开发野生动物的意义
- 第二节 黑线仓鼠
- 第三节 长爪沙鼠
- 第四节 树鼩
- 第五节 鼠兔
- 第六节 棉鼠
- 第七节 九带犰狳
- 第八节 黑线姬鼠、大仓鼠
- 第九节 有开发价值的其他野生动物
- 第八章 生物医学研究中实验动物的选择
- 第一节 选择原则和方法
- 一、选用与人的机能、代谢、结构及疾病特点相似的实验动物
- 二、选用遗传背景明确,具有已知菌丛和模型性状显着且隐定的动物
- 三、选用解剖、生理特点符合实验目的的要求的动物
- 四、选择不同种系实验动物存在的某些特殊反应
- 第二节 各类实验动物选择索引
- 第九章 生物医学研究中的动物模型
- 第一节 动物模型的意义和优越性
- 第二节 动物模型的分类
- 第三节 动物模型的设计原则和注意事项
- 第四节 动物模型的复制方法
- 第十章 生物医学重点研究课题中的实验动物选择与应用
- 第一节 免疫学研究中实验动物的选择与应用
- 第二节 单克隆抗体研究中实验动物的选择与应用
- 第三节 肿瘤学研究中实验动物的选择和应用
- 第四节 放射生物学研究中实验动物的选择和应用
- 第五节 药理学研究中实验动物的选择与应用
- 一、中枢神经系统药理学研究中的选择与应用
- 二、传出神经药理学实验中的选择与应用
- 三、心血管系统药理实验中的选择与应用
- 四、消化系统药理实验中的选择与应用
- 五、呼吸系统药理实验中的选择与应用
- 六、泌尿系统药理实验中的选择与应用
- 第六节 口腔医学研究中实验动物的选择与应用
- 第七节 计划生育研究中实验动物的选择和应用
- 第八节 微循环研究中实验动物的选择和应用
- 第九节 皮肤病学研究中实验动物的选择与应用
- 第十节 病毒学研究中实验动物的选择与应用
- 第十一节 老年病研究中实验动物的选择与应用
- 第十二节 中医中药研究中实验动物的选择与应用
- 第十一章 生物医学研究的基本途径、方法和影响因素
- 第一节 生物医学研究的基本途径
- 第二节 动物实验基本方法
- 一、动物实验的常用方法
- 二、实验动物的抓取固定方法
- 三、实验动物编号标记方法
- 四、实验动物的随机分组方法
- 五、实验动物被毛的去除方法
- 六、实验动物给药途径和方法
- 七、实验动物用药量的确定及计算方法
- 八、实验动物的麻醉
- 九、实验动物采血方法
- 十、急性动物实验中常用的手术方法
- 十一、实验动物的急救措施
- 十二、实验动物的处死方法
- 第三节 影响动物实验效果的动物因素
- 第四节 影响动物实验效果的动物饲养环境和营养因素
- 第五节 影响动物实验效果的动物实验技术环节因素
- 第十二章 实验动物常用的各种生物学数据
- 第一节 一般生物学数据
- 一、实验动物染色体数目
- 二、实验动物繁殖生理数据
- 三、实验动物组织生长和细胞更新数据
- 四、哺乳动物和人的细胞更新速度
- 五、实验动物和人各类正常组织细胞分裂间期各进相的时间
- 六、哺乳动物和人全身照射的半致死量
- 七、哺乳动物平均寿命和最长寿命
- 八、哺乳动物和人的水代谢期与寿命的关系
- 九、狗与人的年龄对应
- 十、实验动物正常新陈代谢率
- 十一、哺乳动物和人产热量和水半代谢期
- 第二节 生理学数据
- 一、实验动物红细胞总数、压积、体积、大小和血红蛋白浓度
- 二、实验动物白细胞总数、分类计数及血小板数
- 三、实验动物正常骨髓象数值
- 四、实验动物血容量、心率、心输出量
- 五、实验动物全血、血浆、红细胞的容量和静脉血比容
- 六、实验动物血液温度、酸碱度、粘稠度、比重和体温数据
- 七、实验动物血细胞脆性、沉降速度和凝血时间
- 八、实验动物正常血压数值
- 九、实验动物的循环时间
- 十、实验动物心电图正常参考数值(间期)
- 十一、实验动物心电图正常参考数值(波辐电压)
- 十二、实验动物正常心率时心脏周期情况
- 十三、实验动物血液动力学指标数值
- 十四、通气量、耗气量
- 十五、实验动物呼吸器官相对形态特点及外在气体代谢
- 十六、实验动物饲料、饮水要求量和排便排尿量
- 十七、哺乳动物肾的结构与浓缩能力
- 十八、各种动物尿比重
- 第三节 生物化学数据
- 一、实验动物血液中葡萄糖、果糖含量
- 二、实验动物血液中蛋白结合糖总量及分布
- 三、实验动物血中糖代谢产物含量
- 四、实验动物血清脂蛋白及其成分
- 五、实验动物血中脂肪、脂肪酸、甘油酯、胆固醇、胆固醇酯含量
- 六表12-41实验动物血液中磷脂总量及其分类值[SB][60][/SB]
- 七、实验动物血中磷脂总量及其分类值
- 八、实验动物血中氧和二氧化碳含量、二氧化碳压力、钠、氯离子浓度、水及蛋白质含量
- 九、实验动物血浆总蛋白、白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原含量
- 十、实验动物血浆蛋白分类值
- 十一、实验动物血中游离氨基酸含量
- 十二、实验动物血中非蛋白氮、尿素、尿酸含量
- 十三、实验动物血中蛋白质代谢产物含量
- 十四、实验动物血及器官中5-羟色胺含量
- 十五、实验动物器官和血浆中儿茶酚胺含量
- 十六、实验动物血及器官中乙酰胆碱含量
- 十七、实验动物器官中RNA和DNA含量
- 十八、实验动物血及器官中腺苷酸含量
- 十九、实验动物血中吡啶核苷酸、辅羧酶、磷酸吡哆醛、碱性磷酸酶含量
- 二十、实验动物组织与器官中细胞色素氧化酶活性
- 二十一、实验动物器官与组织中琥珀酸脱氢酶含量
- 二十二、实验动物器官与组织中乳酸脱氢酶的活性
- 二十三、实验动物血清与器官中乳酸脱氢酶同功酶的活性
- 二十四、实验动物器官中脱氢酶活性
- 二十五、实验动物血液中氧化还原酶活性
- 二十六、大白鼠器官及血中转氨酶活性
- 二十七 兔、豚鼠器官与血中转氨酶活性
- 二十八、实验动物血及器官中转换酶活性
- 二十九、实验动物血及器官中碱性和酸性磷酸酶活性
- 三十、实验动物器官及血中水解酶活性
- 三十一、实验动物血液中胆碱酯酶活性
- 三十二、实验动物器官与组织中胆碱酯酶活性
- 三十三、实验动物器官与血中醛缩酶及碳酸酐酶活性
- 三十四、实验动物血中维生素A、胡萝卜素、维生素C与D、胆碱、肌醇含量
- 三十五、实验动物血中维生素B1、B2、B6、B12及烟酸、泛酸、叶酸含量
- 三十六、实验动物血液中无机磷、有机磷、铁的含量
- 三十七、实验动物血液中钾、钠、钙、氯、镁含量
- 三十八、实验动物血液中硫、碘、铜、锌、钴、溴、氟含量
- 三十九、实验动物生化指标综合参考值
- 第四节 脏器重量、长度和其他数据
- 附1 实验动物管理条例
- 附2 医学实验动物合格证暂行条例(北京)
- 《北京医学实验动物检定暂行标准》
- 参考文献