三、限制性核酸内切酶的分类

《生物化学与分子生物学》书籍目录

按限制酶的组成、与修饰酶活性关系,切断核酸的情况不同,分为三类:

Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+,S腺苷甲硫氨酸及ATP。

Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似,是多亚蛋白质,既有内切酶活性,又有修饰酶活性,切断位点在识别序列周围25-30bp范围内,酶促反应除Mg2+外,也需要ATP供给能量。

Ⅲ类限制性核酸内切酶 只由一条肽链构成,仅需Mg2+,切割DNA特异性最强,且就在识别位点范围内切断DNA。是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。

表20-1 DNA重组技术中最常用的工具酶

主要用途
限制性核酸内切酶识别DNA特定序列,切断DNA链
DNA聚合酶Ⅰ或其大片段(Klenow)①缺口平移制作标记DNA探针
②合成cDNA的第二链
③填补双链DNA3’凹端
④DNA序列分析
耐热DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等)聚合酶链反应(PCR)
DNA连接酶连接两个DNA分子或片段
多核苷酸激酶催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化,制备末端标记探针
末端转移酶在3’末端加入同质多聚物尾
SI核酸酶,绿豆核酸酶降解单链DNA或RNA,使双链DNA突出端变为平端
DNA端酶Ⅰ降解DNA,在双链DNA上产生随机切口
RNA酶A降解除RNA
磷酸酶切除核酸末端磷酸基

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  1. 限制性核酸内切酶的分类《生物化学与分子生物学》
  2. 限制性核酸内切酶《医学遗传学基础》
  3. 限制性核酸内切酶的概念《生物化学与分子生物学》
  4. 限制型心肌病《心脏病学》
  5. 限制性核酸内切酶的命名《生物化学与分子生物学》
  6. 限制型心肌病《默克家庭诊疗手册》
  7. 限制性核酸内切酶的作用《生物化学与分子生物学》
  8. 限制酶切片段长度多态性组织配型法《医学免疫学》
  9. 限制性片段长度多态性《医学遗传学基础》
  10. 现况调查中的偏倚及其防止《预防医学》
  11. 限制性片段长度多态性《生物化学与分子生物学》
  12. 现况调查的种类《预防医学》
  13. 限制性通气不足《病理生理学》
  14. 现况调查的方法《预防医学》
  15. 线胶《外科全生集》
  16. 现况调查《预防医学》
  17. 线粒体《病理学》
  18. 现况调查《流行病学》
  19. 线粒体基因组《医学遗传学基础》
  20. 现患率(prevalence rate)(亦称患病率)《预防医学》
  21. 线粒体抗体《实用免疫细胞与核酸》
  22. 现代中医教育的模式《思考中医》
  23. 线形《气功外气疗法》
  24. 现代中药事业发展的历程《中国医学通史》
  25. 线鱼鳔《本草撮要》
  26. 现代中药事业的主要成就《中国医学通史》
  27. 线障《中医词典》
  28. 现代医院药学的任务《医院药学》
  29. 哯(xiàn现)乳《中医词典》
  30. 现代医学心理学在我国发展简史《医学心理学》
  31. 《中医词典》